Número Browse:0 Autor:editor do site Publicar Time: 2022-05-25 Origem:alimentado
A preparação de uma solução de ouro coloidal para Teste de antígeno adota o método de redução de citrato trissódico para preparar uma solução de ouro coloidal.Pegue 1000 mL de água ultrapura e aqueça até ferver em agitador magnético, adicione 40 mL de solução de ácido cloroáurico a 1%, quando a solução ferver novamente, adicione rapidamente 36 mL de solução de citrato trissódico a 1%, continue fervendo quando a cor de a solução fica roxa por 5 minutos, desligue o aquecedor e restaure o volume original com água ultrapura após o resfriamento.O diâmetro médio e o potencial Zeta das partículas de ouro coloidal foram medidos com um analisador de tamanho de nanopartículas e armazenados à temperatura ambiente no escuro.Então, quais são as informações sobre a preparação de soluções de ouro coloidal para o teste de Antígeno?Vamos dar uma olhada.
Aqui está a lista de conteúdo:
l Preparação de conjugados rotulados com ouro coloidal
l Preparação de tiras de teste rápido de antígeno
l Limite mínimo de detecção
lTeste de estabilidade
Coloque 100 mL de ouro coloidal de teste de antígeno em dois béqueres limpos, respectivamente, de acordo com as condições de pH marcadas otimizadas, adicione 3,3 mL e 2,1 mL de carbonato de potássio 0,1 mol/L para ajustar o pH, agite com um agitador magnético a 300 r/ min por 10 min, e adicionar anticorpo monoclonal de camundongo anti-proteína N e proteína DNP-BSA foram cada 1 mg e agitados por 15 minutos;Foram adicionados 2 mL de solução de BSA a 10% e 2 mL de solução de BSA a 10% e a agitação continuou por 20 minutos;após agitação, a solução de ouro coloidal do teste de antígeno foi transferida para dois tubos de centrífuga de 50 mL, os parâmetros da centrífuga foram definidos como 9.000 r/min, 20 min e 4 °C, e a centrifugação foi realizada.Após a centrifugação, retire o tubo de centrífuga com cuidado, não agite, remova o sobrenadante com uma pipeta, colete o precipitado, reconstitua-o com diluente conjugado até 10 mL e armazene a 4°C no escuro.O diâmetro médio e o potencial Zeta das partículas do conjugado de ouro coloidal do teste de antígeno foram medidos por um analisador de tamanho de nanopartículas.
A almofada de amostra foi revestida uniformemente com a solução de tratamento de almofada de amostra e a quantidade de revestimento de cada fibra de vidro foi de 30 mL e seca a 50°C durante 24 horas.Diluir o teste rápido de antígeno anticorpo monoclonal de camundongo anti-proteína N marcado com ouro coloidal e conjugado de proteína DNP-BSA marcado com ouro coloidal com diluente de conjugado, a proporção de volume é de 18% e 20%, respectivamente, e tratar com o conjugado de ouro coloidal diluído a almofada do acoplador foi uniformemente revestido com líquido, a quantidade de revestimento de cada fibra de vidro foi de 30mL e foi seca a 45°C por 24h.O anticorpo monoclonal anti-proteína N de camundongo e o anticorpo policlonal anti-DNP de coelho foram diluídos com PBS contendo 0,01 mol/L pH 7,4 e 5% de trealose até a concentração de 2,0 mg/mL e 1,0 mg/mL, respectivamente.Como linha de detecção (linha T) e linha de controle de qualidade (Cline), o anticorpo de captura foi revestido em uma membrana de nitrocelulose (membrana NC) e seco a 45°C por 48h.O filme NC preparado, a almofada conjugada, a almofada de amostra e a almofada absorvente de água foram colados na placa inferior de PVC, cortados em 3 mm/faixa com uma talhadeira, colocados em uma caixa de cartão e embalados em um saco de papel alumínio.Durante o teste, insira o swab nasofaríngeo no tubo de elevação pré-preenchido com a solução de extração (10mmol/LPBS, pH7,4, 1%NP-40) e adicione 3 gotas (100μL) gota a gota no orifício da amostra do teste cartão após extração por 15s.Tempo de reação de 15 minutos para interpretação visual.A linha T do teste de antígeno e Cline são positivas, a linha T não está colorida, Cline é negativa, Cline não está colorida, indicando que a tira de teste é eficaz e precisa ser testada novamente.
Estudos de limite mínimo de detecção foram realizados com culturas de vírus mortos pelo calor.O eluato de esfregaços nasofaríngeos de pessoas saudáveis foi utilizado como matriz negativa para o teste de Antígeno.Primeiro, foi realizada uma diluição gradiente de 10 vezes.Após o resultado negativo do teste rápido de antígeno, a concentração anterior foi então diluida em gradiente de 2 vezes, e pelo menos 19 vezes em 20 testes foram positivos.O nível de concentração (≥95%) foi utilizado como limite mínimo de detecção do reagente.
Coloque o cartão de reagente preparado para teste de antígeno em um forno a 50°C e teste com substâncias de controle de qualidade de alta e baixa concentração a cada duas semanas.Repita o teste 3 vezes para cada amostra.A diferença na profundidade da banda entre o reagente de destruição acelerada a alta temperatura e o reagente de controlo durante 1 semana e 8 semanas.
O texto acima contém informações relevantes sobre a preparação da solução de ouro coloidal para o teste de antígeno.Se você estiver interessado no Teste rápido de antígeno COVID-19, teste rápido de antígeno SARS-CoV-2, você pode entrar em contato conosco.Nosso site é www.bioteke.cn.
