Introdução às máquinas PCR

Máquina PCR, também conhecido como instrumento de amplificação de gene PCR, instrumento de amplificação de PCR, instrumento de amplificação de ácido nucleico de reação em cadeia da polimerase, é um instrumento que amplifica DNA específico usando a tecnologia PCR (reação em cadeia da polimerase).A máquina de PCR é amplamente utilizada em laboratórios médicos e biológicos, como para determinar se um corpo de teste apresentará um perfil de doença genética, para diagnosticar doenças infecciosas doenças, para replicar genes e para identificar parentesco.O que é uma máquina de PCR?

Aqui está a lista de conteúdo:

l A estrutura básica de uma máquina PCR

l Princípio de funcionamento da máquina PCR

l Cinética de reação das máquinas de PCR

A estrutura básica de uma máquina PCR

Uma máquina PCR geralmente consiste em uma parte de cobertura quente, uma parte de ciclo térmico, uma parte de transmissão, uma parte de controle e uma parte de fonte de alimentação, etc.

Princípio de funcionamento da máquina PCR

O princípio de funcionamento do Máquina PCR é semelhante ao processo de replicação natural do DNA, cuja especificidade depende de iniciadores oligonucleotídicos complementares a ambas as extremidades da sequência alvo, e consiste em três etapas básicas de reação: desnaturação-recozimento-extensão.

1. Desnaturação do DNA modelo

O DNA molde é aquecido a cerca de 93°C por um certo tempo para dissociar o DNA molde de fita dupla ou o DNA de fita dupla formado por uma máquina de PCR para torná-lo de fita simples para que possa se ligar aos primers na preparação para a próxima rodada de reação.

2. Recozimento (desnaturação) de DNA modelo e primers

Após o ADN molde ser desnaturado em cadeia simples por aquecimento, a temperatura é reduzida para cerca de 55°C e os iniciadores são emparelhados e ligados à sequência complementar de cadeia simples do ADN modelo.

3. Extensão de primers

O conjugado molde-iniciador de DNA é sintetizado sob a ação da TaqDNA polimerase, usando dNTP como material de reação e a sequência alvo como molde, para sintetizar uma nova fita replicada semiconservada complementar à fita molde de DNA de acordo com o princípio da base -emparelhamento e replicação semiconservada.

Ao repetir o processo de desnaturação-recozimento-extensão, mais “cadeias replicadas semiconservadas” podem ser obtidas, e essas novas cadeias podem ser usadas como modelos para o próximo ciclo.

A máquina de PCR leva de 2 a 4 minutos para completar cada ciclo e assim por diante repetidamente, o DNA produzido em cada ciclo pode se tornar o modelo para o próximo ciclo, e cada ciclo amplifica o número de cópias da região específica do DNA entre dois primers sintéticos em 1 - vezes, e o produto da máquina de PCR amplifica rapidamente na forma exponencial de 2. Após 25 ~ 30 ciclos (2 ~ 3 horas), a máquina de PCR pode, teoricamente, amplificar o gene mais de 109 vezes após 25 ~ 30 rodadas (2 ~ 3 horas) e, na prática, geralmente pode atingir 106 ~ 107 vezes.

Cinética de reação da máquina PCR

As três etapas de reação do Máquina PCR são repetidos, resultando em um aumento exponencial na quantidade de amplificação de DNA.A amplificação final do DNA da reação pode ser calculada usando y=(1+X)n.Y representa o número de cópias do fragmento de DNA amplificado, X representa a eficiência média de amplificação por amplificação e n representa o número de ciclos.O valor teórico da eficiência média de amplificação é de 100%, mas no estágio inicial da reação real, o aumento do fragmento de DNA da sequência alvo é exponencial e, com o acúmulo gradual de produtos da máquina de PCR, o fragmento de DNA amplificado não aumenta mais exponencialmente, mas entra no período de crescimento linear ou período estacionário, ou seja, o 'efeito de estagnação', de modo que a eficiência média da máquina PCR atinge A eficiência média da máquina PCR não atinge o valor teórico.

A Bioteke Corporation, que se concentra em diagnóstico molecular e detecção rápida, particularmente na extração de ácidos nucleicos, é um fabricante profissional de alta tecnologia e máquinas de PCR.É ambientado na cidade de Wuxi, província de Jiangsu, China.Então, estamos ansiosos para cooperar com você.