Número Browse:233 Autor:Bioteke Corporation Publicar Time: 2021-02-18 Origem:Bioteke
De acordo com a composição do líquido, ele pode ser dividido em dois tipos, inativado e não inativado. Entre eles, a solução de preservação de vírus inativados contém Tris, sal de guanidina, EDTA, etc., cujo objetivo principal é destruir as capas proteicas de células e vírus e liberar ácidos nucleicos, para que a detecção de ácidos nucleicos possa ser realizada por subsequente RT-PCR fluorescente em tempo real para determinar se a amostra contém a sequência do vírus.
A solução de preservação inativada pode efetivamente lisar a estrutura do vírus e fazer com que ele perca a capacidade de infectar. É mais seguro para os inspetores e pode inibir efetivamente a reprodução de fungos e bactérias. No entanto, devido à adição de sal de guanidina, pode deixar iões salinos na solução de ácido nucleico. Se a concentração for muito alta e se a atividade da polimerase no kit de teste a jusante for altamente sensível à concentração de íons salinos, isso fará com que o valor Ct do teste fique atrasado ou até mesmo falso negativo.
A solução de preservação não inativada geralmente inclui os tipos UTM e VTM. Os componentes da solução de preservação de vírus não inativados baseiam-se principalmente na solução de Hank. Com base na solução de Hank, também adiciona vários tampões como gentamicina, antibióticos fúngicos, BSA (quinto componente bovino da albumina sérica), tampão biológico HEPES, aminoácidos, crioprotetores, glicerina e outros componentes são usados para manter a integridade e atividade biológica do vírus. A solução de preservação não inativada preserva melhor a integridade do vírus, portanto a taxa de detecção é maior, mas necessita de tratamento de inativação em banho-maria antes da detecção.
Os usuários podem escolher o tipo de solução de preservação razoavelmente de acordo com seus próprios cenários de uso.


2、Após o armazenamento da amostra, qual é a sensibilidade de detecção?
Para facilitar a seleção de diferentes tipos de tubos de armazenamento, testamos diferentes marcas, em condições de armazenamento de 4°C e em diferentes dias de armazenamento. A sensibilidade da detecção de ácido nucleico do novo coronavírus é a seguinte.


Após 14 dias de armazenamento a 4°C, a comparação do efeito de preservação de diferentes marcas de UTM

Para facilitar a seleção de diferentes tipos de tubos de preservação, testamos a sensibilidade da detecção de ácido nucleico do novo coronavírus sob diferentes marcas, condições de armazenamento em temperatura ambiente e diferentes dias de armazenamento (o primeiro dia, o terceiro dia e o sétimo dia). Os resultados são os seguintes.
Após 7 dias de armazenamento à temperatura ambiente, comparação dos efeitos de armazenamento de diferentes marcas de ITM

Após 7 dias de armazenamento em temperatura ambiente, comparação dos efeitos de armazenamento de diferentes marcas de VTM

Após 7 dias de armazenamento à temperatura ambiente, comparação dos efeitos de armazenamento de diferentes marcas de UTM

Em geral, o valor Ct de Bioteke é inferior ao de algumas marcas comuns no mercado, independentemente da temperatura ambiente ou das condições de armazenamento de 4°C. A sensibilidade de detecção é maior e os resultados do teste são mais estáveis.
3. Qual é o efeito da solução de preservação de inativação (ITM)?
Número de placa em diferentes tempos de inativação (0, 1, 2, 5, 10, 20, 40min)
Vírus | Título de vírus | Tempo de inativação | Número de placa | Aceitabilidade y | ||
HSV-1 | 1×10^5 UFP/mL | 0 | 48 | 55 | 51 | / |
1 minuto | 0 | 0 | 0 | Aceito | ||
2 minutos | 0 | 0 | 0 | Aceito | ||
5 minutos | 0 | 0 | 0 | Aceito | ||
10 minutos | 0 | 0 | 0 | Aceito | ||
20 minutos | 0 | 0 | 0 | Aceito | ||
40 minutos | 0 | 0 | 0 | Aceito | ||

Figuras de placa em diferentes momentos de inativação (0, 1 5, 40 min) (a placa é mostrada na caixa vermelha)
Conclusões:
O produto Bioteke, inativando o meio de transporte (ITM), pode efetivamente inativar o vírus HSV 1.
4、Recursos da solução de preservação de vírus Bioteke
a) Fornecer múltiplos tipos de soluções de preservação como UTM, VTM e ITM;
b) Pode ser usado com cotonete Bioteke para atender múltiplas necessidades;
c) Matérias-primas selecionadas, combinadas com kit de extração de ácido nucleico Bioteke para garantir a quantidade inicial de cópias da amostra.
5. Os relatórios de inspeção que Bioteke obteve para a Solução de Preservação de Vírus
Padrões | Unidade de teste |
ISO EN11137-1:2015 EN11137-2:2013 ISOEN11137-3:2017 | Tecnologia de teste Co. de Wujiang Dasheng, Ltd. |
ISO11737-1:2018 | GV |
ALCANÇAR | GV |
ISO 10993 | GV |
Anexo: ambiente de produção


Referências
【1】《Novo Guia de Tecnologia de Testes Laboratoriais de Pneumonia Coronária (Terceira Edição)》, Centro Chinês de Controle e Prevenção de Doenças.
【2】《Diretrizes provisórias para coleta, manuseio e teste de amostras clínicas de pacientes sob investigação (PUIs) para o novo coronavírus de 2019 (2019-nCoV)》.
【 3 】 Stephen K Hashmi, Miriam Bührle, Michael Wöl fle, et al.
Qualificação de esfregaços flocados de alta recuperação em comparação com esfregaços de rayon tradicionais para monitoramento ambiental microbiológico de superfícies[J]. jornal pda de ciência e tecnologia farmacêutica, 2008, 62(3):191.
【4】 Daley P, Castriciano S, Chernesky M, Smieja M. Comparação de esfregaços flocados e de rayon para coleta de células epiteliais respiratórias de voluntários não infectados e pacientes sintomáticos. 44(6):2265-2267. doi:10.1128/JCM.02055-05.
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【6】Liu Yanbin, Liu Tao, Cui Yue, Wang Bo, Luo Fengming. Comparação de dois métodos de amostragem de esfregaço nasal e esfregaço de garganta na triagem de ácido nucleico para nova pneumonia por coronavírus[J]. Jornal Chinês de Cuidados Respiratórios e Críticos, 2020, 02:141-143.