Ferramenta de detecção de infecção do trato urinário e resistência a medicamentos: a solução rápida e precisa da Bioteke

Infecção do trato urinário (ITU) e kit de detecção de genes de resistência a medicamentos

- Solução de diagnóstico rápida e precisa

Fundo

• A infecção do trato urinário (ITU) é uma doença comum e de alta prevalência em todo o mundo, e sua taxa de incidência fica atrás apenas das doenças do trato respiratório entre as doenças infecciosas.

• De acordo com estatísticas estrangeiras, a taxa de incidência de ITU é de 2 a 5%, que é uma doença infecciosa com alta incidência e mortalidade e que ameaça seriamente a saúde humana e a segurança da vida.

• De acordo com estatísticas relevantes da Organização Mundial da Saúde (OMS), 130 milhões a 175 milhões de pessoas sofrem de ITU todos os anos em todo o mundo, e a ITU tornou-se a segunda maior doença infecciosa depois da infecção do trato respiratório. Estima-se que nos Estados Unidos, 13,3% (12,8 milhões) de mulheres e 2,3% (2 milhões) de homens são infectados com ITU todos os anos, resultando num gasto do sistema médico dos EUA cerca de 3,5 mil milhões de dólares por ano.

• No entanto, nos últimos 10 anos, com a aplicação extensiva de medicamentos antimicrobianos de amplo espectro nos campos clínico e de pecuária, o espectro de resistência dos patógenos mudou e o problema da resistência aos medicamentos tornou-se cada vez mais sério. O uso empírico de antibióticos no tratamento clínico pode atrasar o melhor tempo de tratamento e levar ao abuso de antibióticos. Portanto, o diagnóstico de patógenos e a predição de resistência aos medicamentos são muito importantes na orientação do tratamento medicamentoso de pacientes com infecções do trato urinário.

• A urina é estéril em circunstâncias normais, mas isso não significa que todas as bactérias na urina sejam bactérias patogênicas. Somente quando as bactérias detectadas na urina podem crescer e se multiplicar no trato urinário e causar infecção, elas podem ser diagnosticadas como bactérias patogênicas da infecção do trato urinário. Os patógenos do trato urinário são invasivos e podem invadir e colonizar o urotélio e multiplicar-se na urina. Mais de 95% dos patógenos da infecção do trato urinário são espécies únicas de bactérias. Há também um pequeno número de infecções complicadas do trato urinário causadas por múltiplos patógenos.

• Atualmente, o padrão ouro para o diagnóstico de patógenos de infecção do trato urinário é o isolamento bacteriano na urina, cultura, identificação e análise de sensibilidade a medicamentos. No entanto, o método de cultura tem um ciclo longo, geralmente de 5 a 7 dias, e tem uma baixa taxa positiva e uma faixa de aplicação limitada (alguns patógenos são difíceis de cultivar in vitro). Devido ao longo tempo desde o início até o relato, é fácil perder o melhor período de tratamento na fase aguda. Nos últimos anos, o teste de ácido nucleico tem sido cada vez mais utilizado no diagnóstico de patógenos de infecção do trato urinário em todo o mundo. O alvo do teste de ácido nucleico é o material genético do patógeno. Ao amplificar seletivamente a sequência alvo, podem ser alcançadas sensibilidade e especificidade de detecção muito altas. Como o teste de ácido nucleico não requer isolamento e cultura bacteriana, ele pode detectar patógenos de forma rápida e sensível nos estágios iniciais da doença.

  
  

Projeto de detecção de UTI e DR da Bioteke

• Este projeto pretende desenvolver um kit de detecção de ácido nucleico para patógenos de infecção do trato urinário e genes resistentes a medicamentos baseado em uma plataforma inovadora de detecção rápida de ácido nucleico e tecnologia patenteada de liofilização por PCR fluorescente para orientar o tratamento clínico nos estágios iniciais da doença.

• Infecção do Trato Urinário Bioteke (ITU) e Painel DR (Método de PCR de Fluorescência) é usado para detecção qualitativa in vitro de 19 ácidos nucleicos de patógenos comuns e 12 genes comuns resistentes a medicamentos em amostras de urina.

• Infecção do Trato Urinário Bioteke (ITU) e Painel DR (Método de PCR de Fluorescência) projeta primers e sondas específicos para diferentes patógenos e genes resistentes a medicamentos e usa reação em cadeia da polimerase (qPCR) e tecnologia de múltiplas sondas fluorescentes para amplificar e detectar sequências específicas de ácidos nucleicos de patógenos e genes resistentes a medicamentos. Ao adicionar levedura comestível como padrão interno (CI), o processo de extração de ácido nucleico e detecção de patógenos na urina é monitorado para evitar efetivamente resultados falsos negativos. Para evitar a contaminação por aerossol do produto de amplificação, o sistema enzima UDG/dUTP é adicionado ao sistema de amplificação para decompor eficazmente o produto de amplificação e evitar resultados falsos positivos.

• Este kit é um sistema liofilizado totalmente pré-misturado. A enzima Taq, a enzima UDG, o tampão de reação, os primers específicos e as sondas necessárias para a amplificação são todos liofilizados em tubos de PCR. Os poços 1-8 contêm pós liofilizados para diferentes genes alvo. Cada poço utiliza canais de fluorescência de 4 cores para detecção e um total de 31 ácidos nucleicos do analito alvo são detectados. O método de utilização é simples e pode ser testado diretamente após a adição da solução de reconstituição e do ácido nucleico da amostra extraída.

Significado do Projeto

• As doenças infecciosas sempre foram um importante problema de saúde pública em todo o mundo. No seu diagnóstico e tratamento, a identificação rápida e precisa dos patógenos é crucial. Os métodos de detecção tradicionais incluem principalmente detecção morfológica, separação de cultura, detecção bioquímica, imunologia e detecção de ácido nucleico, que são simples de operar, relativamente baixos em custo de detecção e têm boa sensibilidade e especificidade. Eles ainda são amplamente utilizados na prática clínica. Embora a tecnologia metagenômica de detecção de ácido nucleico mNGS possa superar o problema da detecção de um único patógeno, ela possui altos requisitos de equipamento, pessoal e custos.

• O uso da tecnologia de PCR quantitativo de fluorescência multiplex multi-alvo neste campo basicamente supera as deficiências de outros métodos de detecção, como longo tempo, operação complexa e altos requisitos de pessoal.

1. Orientar medicação: Clinicamente, a medicação é baseada principalmente na experiência no tratamento de infecções do trato urinário, principalmente no uso cego de antibióticos. A medicação baseada na identificação do patógeno é a chave para melhorar o prognóstico do paciente.

2. Encontre a causa da doença em tempo hábil: Embora o método tradicional de cultura bacteriana tenha alta precisão, é demorado, tem uma proporção considerável de falsos negativos e é propenso a atrasar o tratamento. A detecção quantitativa por PCR de fluorescência multiplex de ácido nucleico pode identificar patógenos em um estágio inicial e usar medicação sintomática a tempo, de modo a melhorar melhor o prognóstico de pacientes com infecção do trato urinário.

3. Melhorar as capacidades de detecção do hospital: Depois que esse método for estabelecido no hospital, ele poderá não apenas fornecer melhores métodos de detecção para pacientes que chegam ao hospital, mas também fornecer um novo método de detecção para o hospital. Ao mesmo tempo, também fornece dados médicos básicos mais abrangentes para a clínica.